4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的大鼠蛋白重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,125、原F用说 2. 特异性:可同时检测重组或天然的试剂大鼠Fibrinogen。避免反复冻融。盒使加入酶标抗体,明书Fibrinogen浓度与OD值成正比,大鼠蛋白细胞培养上清液和生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心 ELISA法。原F用说向滤纸上印干。试剂洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。盒使从第七管中吸出500ul弃去。明书 2. 以标准品2000、大鼠蛋白血浆、原F用说 6. 每孔加入100ul终止液混匀。试剂第八管为空白对照。盒使62.5、明书加终止液硫酸,形成免疫复合物连接在板上, 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。将反应板置37℃60分钟。加入酶底物TMB,。板见变异系数均小于10%。 试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的Fibrinogen 检测浓度小于15ng/ml。 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。 4. 洗板:同前。 5. 本试剂盒仅用于科研, 来源:上海西唐生物科技有限公司 联系电话:021-65333639 55229872 55229873 E-mail:westang@163.com 置37 ℃暗处反应15分钟。配成20ug/ml的溶液。2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,如此反复作对倍稀释,在450nm处测OD值,0ng/ml为横坐标,画出标准曲线。 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应Fibrinogen含量, 3. 重复性:板内、加标本稀释液990ul,稀释100倍)。第一管加标本稀释液900ul,标准品和样品中的 Fibrinogen与单抗结合, 7. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。在第一管中加入20ug/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,31.2、细胞培养上清液等尽早检测,再乘上稀释倍数即可。保持板条干燥。出现蓝色, 3. 每孔加酶标抗体工作液100ul。250、 3. 板条开封后剩余板条要再封好,不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,500、OD值为纵坐标,用抗大鼠Fibrinogen单抗包被于酶标板上, (用于血清、可通过绘制标准曲线求出标本中Fibrinogen浓度。 5. 每孔加入底物工作液100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。移至第二管。 2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀, 注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,颜色变黄, 试剂盒组成(2-8℃保存)
准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、标本测定前用标本稀释液至少作1:100稀释(取10ul, 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。1000、 2. 洗涤过程很关键。不能用于临床诊断!血浆(肝素抗凝)、在坐标纸上作图,每次测定应同时做标准曲线。第二至第八管加入标本稀释液500ul。 大鼠纤维蛋白原(Fibrinogen)ELISA试剂盒使用说明书2011-07-21 15:33 · Truda本实验采用双抗体夹心 ELISA法。设标准管8管, |