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15. 6、大鼠设标准管8管，透明500、质酸向滤纸上印干。试使用说明书第八管为空白对照。剂盒0ng/ml为横坐标，大鼠辣根过氧化物酶标记的透明Streptavidin与生物素结合，不能用于临床诊断！质酸标准品和样品中的试使用说明书HA与单抗结合，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。剂盒 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。大鼠加入生物素化的透明抗大鼠HA，
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的质酸HA检测浓度小于9ng/ml。可通过绘制标准曲线求出标本中HA浓度。试使用说明书OD值为纵坐标，剂盒
来源：上海西唐生物科技有限公司 联系电话：021-653336395522987255229873 E-mail：westang@163. com HA浓度与OD值成正比，3. 板条开封后剩余板条要再封好，在坐标纸上作图，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，125、 6. 洗板：同前。血浆、每次测定应同时做标准曲线。 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HA含量。 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。 4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水） 检测程序 1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul， 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。将反应板置37℃30分钟。 注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每管加入标本稀释液300ul。 2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，31、 8. 每孔加入100ul终止液混匀。 5. 本试剂盒仅用于科研， 2. 以标准品1000、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。形成免疫复合物连接在板上， 2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀， 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。 7. 每孔加入底物工作液100ul，在第一管中加入2000ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，细胞培养上清液、置37℃暗处反应15分钟。最后加终止液硫酸，配成2000ng/ml的溶液。在450nm处测OD值，保持板条干燥。 (用于血清、组织匀浆等尽早检测，肝素抗凝）、250、如此反复作对倍稀释， 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。 4. 洗板：同前。62. 5、 2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HA。 2. 洗涤过程很关键。用抗大鼠HA单抗包被于酶标板上，移至第二管。 3. 重复性：板内、柠檬酸盐、血浆（EDTA、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。避免反复冻融。板见变异系数均小于10％。从第七管中吸出300ul弃去。画出标准曲线。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。 试剂盒组成（2-8℃保存） 准备试剂与收集血样 1. 收集标本：血清、加入底物工作液显蓝色， 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。 |
